實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀是分子生物學(xué)中一種強(qiáng)大的工具，其用于定量檢測(cè)特定DNA或RNA分子的擴(kuò)增過程的技術(shù)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀則是執(zhí)行這一技術(shù)的平臺(tái)，它通過增加一個(gè)熒光信號(hào)采集系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)PCR擴(kuò)增過程的實(shí)時(shí)監(jiān)控。在擴(kuò)增時(shí)，引物利用同位素或熒光素進(jìn)行標(biāo)記，與熒光探針和模板特異性結(jié)合進(jìn)行擴(kuò)增。擴(kuò)增信號(hào)通過實(shí)時(shí)采集系統(tǒng)輸送到計(jì)算機(jī)進(jìn)行分析處理，最終得出量化的實(shí)時(shí)結(jié)果。

　　實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀的保養(yǎng)需從日常清潔、操作規(guī)范、環(huán)境管理、定期維護(hù)及預(yù)防污染五個(gè)方面入手，具體方法如下：

　　一、日常清潔與保養(yǎng)

　　儀器表面清潔

　　定期用軟布蘸取少量清水擦拭儀器表面，清洗后擦干。

　　若試劑泄漏，需用70%酒精擦拭干凈，避免腐蝕性液體接觸儀器。

　　注意：清潔前必須關(guān)閉電源并拔掉電源線，禁止使用強(qiáng)腐蝕性或有機(jī)溶劑。

　　反應(yīng)孔（樣品孔）清潔

　　灰塵或雜質(zhì)會(huì)影響PCR擴(kuò)增和熒光檢測(cè)，需每3個(gè)月清潔一次。

　　方法：用吹氣球或洗耳球輕輕吹拭孔內(nèi)灰塵；若孔內(nèi)有熒光物質(zhì)污染，可用移液槍吸取90%酒精浸泡20分鐘，吸出酒精后自然風(fēng)干或電吹風(fēng)吹干。

　　防護(hù)：不使用時(shí)關(guān)閉滑蓋，防止灰塵進(jìn)入。

　　熱蓋清潔

　　熱蓋需用酒精或純水定期擦拭，確保溫控性能良好，避免影響反應(yīng)溫度均勻性。

　　二、操作規(guī)范與注意事項(xiàng)

　　開關(guān)機(jī)頻率

　　避免頻繁開關(guān)儀器，兩次開關(guān)間隔時(shí)間不低于30秒。

　　實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，保持待機(jī)狀態(tài)10分鐘（內(nèi)部風(fēng)扇持續(xù)工作），待模塊溫度降至室溫后再關(guān)閉電源，防止熱應(yīng)力損傷。

　　電源與連接

　　使用原廠商提供的電源線和通訊線，避免與其他大功率設(shè)備共用插座，防止電壓波動(dòng)影響運(yùn)行。

　　建議通過穩(wěn)壓器和UPS（不間斷電源）連接電源，保護(hù)電路并確保試驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定。

　　耗材使用

　　選用熱密封性好的PCR管，避免側(cè)壁和管蓋帶有記號(hào)筆標(biāo)記（如需標(biāo)記，僅限8聯(lián)管兩端），防止熒光信號(hào)干擾。

　　實(shí)驗(yàn)結(jié)束后及時(shí)取出PCR管，避免溫度下降導(dǎo)致管蓋冷縮，氣溶膠溢出污染儀器。

　　三、環(huán)境管理

　　溫濕度控制

　　環(huán)境溫度建議18℃-35℃，濕度0-85%。溫度過低可能導(dǎo)致檢測(cè)無效（如0℃以下時(shí)陽性對(duì)照陰性）。

　　避免儀器暴露于潮濕、高溫或腐蝕性氣體環(huán)境中。

　　防塵與防干擾

　　儀器應(yīng)放置在灰塵較少、遠(yuǎn)離水源和熱源的地方，無強(qiáng)磁場(chǎng)干擾。

　　多臺(tái)儀器同時(shí)使用時(shí)，保持間距≥50cm，降低相互影響。

　　四、定期維護(hù)與校準(zhǔn)

　　軟件更新與校準(zhǔn)

　　定期檢查制造商網(wǎng)站，下載并安裝最新軟件版本，修復(fù)漏洞并提升性能。

　　根據(jù)儀器型號(hào)，每半年至一年進(jìn)行一次熒光校正（如ABI品牌儀器），確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。

　　溫控系統(tǒng)檢查

　　定期驗(yàn)證溫度控制的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性，若發(fā)現(xiàn)溫度偏差（如各孔平均溫度差＞1-2℃），需聯(lián)系專業(yè)人員調(diào)整或維修。

　　濾芯更換

　　根據(jù)使用頻率，定期更換空氣濾芯，防止灰塵進(jìn)入儀器內(nèi)部，延長電子元件壽命。